◎ Microswitches ho an'ny fitantanana ranon-javatra azo itokisana sy azo itokisana

Misaotra anao nitsidika www.chinacdoe.com.Ny kinova browser ampiasainao dia manana fanohanana CSS voafetra.Mba hahazoana traikefa tsara indrindra, manoro hevitra anao izahay hampiasa navigateur nohavaozina (na esory ny Compatibility Mode amin'ny Internet Explorer).Mandritra izany fotoana izany, mba hiantohana ny fanohizana ny fanohanana, dia hanolotra ny tranokala tsy misy fomba sy JavaScript izahay.

Ny rafitra Lab-on-a-chip miaraka amin'ny fahaiza-manao eo an-toerana dia manolotra ny mety hisian'ny fitiliana haingana sy marina ary ilaina amin'ny toerana voafetran'ny loharanon-karena izay tsy misy fitaovana biomedical sy matihanina voaofana.Na izany aza, ny famoronana rafitra fitiliana point-of-care izay manana ny endri-javatra ilaina rehetra ho an'ny famoahana multifunctional, famoahana amin'ny fangatahana, fampisehoana azo antoka ary fitahirizana maharitra ny reagents dia mbola fanamby lehibe.Eto izahay dia mamaritra ny teknôlôjian'ny micro travel switch izay afaka manodinkodina ranon-javatra amin'ny lafiny rehetra, manome valiny mazava sy mifandanja amin'ny tsindrin-drivotra ampiharina, ary mijanona ho miorina amin'ny hetsika tampoka sy ny hovitrovitra.Mifototra amin'ny teknolojia, dia mamaritra ihany koa ny fivoaran'ny rafitra fanehoan-kevitry ny rojo polymerase izay mampiditra ny fampidirana, ny fampifangaroana ary ny fanehoan-kevitra rehetra ao anatin'ny dingana iray, izay manatanteraka "sample-in-answer-out" fampisehoana ho an'ny santionan'ny nasal klinika rehetra avy amin'ny marary 18 miaraka amin'ny Ny gripa sy ny fanaraha-maso tsirairay 18, mifanaraka tsara amin'ny hamafin'ny fluorescence amin'ny fihetsiketsehan'ny rojo polymerase mahazatra (pearson coefficients> 0.9).Mifototra amin'ny teknolojia, dia mamaritra ihany koa ny fivoaran'ny rafitra fanehoan-kevitry ny rojo polymerase izay mampiditra ny fampidirana reagent, ny fampifangaroana ary ny fiasan'ny fanehoan-kevitra ao anatin'ny dingana iray, izay manatanteraka "sample-in-answer-out" fampisehoana ho an'ny santionany nasal klinika rehetra avy amin'ny marary 18. miaraka amin'ny gripa sy ny fanaraha-maso manokana 18, mifanaraka tsara amin'ny hamafin'ny fluorescence amin'ny fihetsiketsehan'ny rojo polymerase mahazatra (pearson coefficients > 0.9).Основываясь на эной тписыe описыeваем разработку разработкы систеразной цеакции, которая объединяет функции введения реагентов, с сешивания и пеакции в односе, выомпес П и 18 отдельных контролей, в хорошем соответствии интенсивности флуоресреценции со стандартной полимеразноифкифец Пирсона> 0,9).Mifototra amin'ity teknolojia ity, dia mamaritra ihany koa ny fivoaran'ny rafitra fanehoan-kevitry ny rojo polymerase izay manambatra ny asan'ny tsindrona, ny fampifangaroana ary ny fanehoan-kevitra ao anatin'ny dingana tokana, ahafahan'ny santionany-in-valiny ho an'ny santionany amin'ny orona klinika rehetra avy amin'ny mararin'ny gripa 18.ary ny fanaraha-maso manokana 18, mifanaraka tsara amin'ny hamafin'ny fluorescence fanehoan-kevitry ny rojo polymerase mahazatra (pearson's coefficients> 0.9).Mifototra amin'ity teknolojia ity, dia mamaritra ihany koa ny fivoaran'ny rafitra fanehoan-kevitry ny rojo polymerase izay mampiditra ny fanindronana reagent, ny fampifangaroana ary ny fanehoan-kevitra mba hamakafaka ireo santionany nasal klinika rehetra avy amin'ny santionany marary nasal 18. tsara miaraka amin'ny fihetsiketsehan'ny rojo polymerase mahazatra (coefficient Pearson> 0.9).Ny sehatra natolotra dia miantoka ny automatique azo itokisana amin'ny famakafakana biomedical ary noho izany dia afaka manafaingana ny fivarotana fitaovana fitiliana isan-karazany.
Ny aretin'olombelona mipoitra, toy ny areti-mifindra COVID-19 2020 izay namoizana ain'olona an-tapitrisany, dia miteraka loza mitatao ho an'ny fahasalamana manerantany sy ny sivilizasionan'ny olombelona1.Ny fitiliana aloha sy haingana ary marina dia zava-dehibe mba hifehezana ny fihanaky ny viriosy sy hanatsara ny vokatry ny fitsaboana.Ny tontolo iainana diagnostika fototra miorina amin'ny laboratoara afovoany izay handefasana santionany fitsapana any amin'ny hopitaly na toeram-pitsaboana ary tantanin'ny matihanina dia mametra ny fidirana ho an'ny olona efa ho 5.8 lavitrisa eran'izao tontolo izao, indrindra fa ireo mipetraka amin'ny toerana voafetran'ny loharanon-karena.izay misy ny tsy fahampian'ny fitaovana biomedical lafo vidy sy ny manam-pahaizana manokana.mpitsabo 2. Noho izany, ilaina maika ny hamolavola rafitra laboratoara mora vidy sy mora ampiasaina miaraka amin'ny fahaiza-manao fitiliana amin'ny fitsaboana (POCT) izay afaka manome vaovao momba ny diagnostika ara-potoana ny mpitsabo mba handraisana fanapahan-kevitra momba ny aretina. .ary fitsaboana 3.
Ny torolalan'ny Fikambanana Iraisam-pirenena Momba ny Fahasalamana (OMS) dia milaza fa ny POCT tsara indrindra dia tokony ho mora, mora ampiasaina (mora ampiasaina miaraka amin'ny fampiofanana kely), marina (miala amin'ny ratsy diso na tsara diso), haingana sy azo itokisana (manome fananana azo averina tsara), ary azo aterina (afaka mitahiry maharitra ary mora azon'ny mpampiasa farany)4.Mba hahafeno ireo fepetra ireo, ny rafitra POCT dia tsy maintsy manome ireto endri-javatra manaraka ireto: dosie azo ampiasaina mba hampihenana ny fidirana an-tsehatry ny tanana, famotsorana amin'ny fangatahana hanesorana ny fitaterana reagent ho an'ny valim-panadinana marina, ary fampisehoana azo itokisana mba hanoherana ny fihovitrovitry ny tontolo iainana.Amin'izao fotoana izao, ny fitaovana POCT be mpampiasa indrindra dia ny lateral flow strip5,6 misy sosona maromaro misy porous nitrocellulose membranes izay manosika santionany kely dia kely, mihetsika miaraka amin'ireo reagents efa tsy mihetsika amin'ny hery kapila.Na dia manana tombony aza izy ireo amin'ny vidiny mora, mora ampiasaina ary vokatra haingana, ny fitaovana POCT mifototra amin'ny fikorianan'ny rano dia tsy azo ampiasaina afa-tsy amin'ny fitsapana biolojika (ohatra, fitsapana glucose7,8 sy fitsapana bevohoka9,10) nefa tsy mila fanadihadiana maromaro.fanehoan-kevitra (ohatra ny fametahana reagents maromaro, fampifangaroana, multiplexing).Fanampin'izany, ny hery mitarika izay mifehy ny fihetsehan'ny fluid (izany hoe, ny hery kapila) dia tsy manome firindrana tsara, indrindra eo anelanelan'ny batch, ka miteraka tsy fahampian'ny famerenana11 ary mahatonga ny tady mikoriana amin'ny sisiny ho ilaina indrindra amin'ny fahitana tsara12,13.
Ny fahaiza-mamokatra miitatra amin'ny micro- sy nanoscale dia namorona fahafahana ho an'ny fampivoarana fitaovana POCT microfluidic ho an'ny fandrefesana fatra14,15,16,17.Amin'ny alàlan'ny fanitsiana ny fananan'ny interface 18, 19 sy ny geometry amin'ny fantsona 20, 21, 22, dia azo fehezina ny herin'ny kapilara sy ny taham-pidiran'ireo fitaovana ireo.Na izany aza, ny fahatokisana azy ireo, indrindra ho an'ny ranon-javatra mando be dia be, dia mbola tsy azo ekena noho ny tsy fahatomombanan'ny famokarana, ny lesoka ara-pitaovana ary ny fahatsapan'ny fihovitrovitra ny tontolo iainana.Ho fanampin'izany, satria misy fikorianan'ny kapilara noforonina ao amin'ny interface tsara-gazy, tsy misy fikorianan'ny fanampiny azo ampidirina, indrindra aorian'ny famenoana ny fantsona mikrofluida amin'ny rano.Noho izany, mba hahitana sarotra kokoa, dia tsy maintsy atao ny dingana maromaro amin'ny tsindrona santionany24,25.
Amin'ireo fitaovana microfluidic, fitaovana microfluidic centrifugal amin'izao fotoana izao dia iray amin'ireo vahaolana tsara indrindra ho an'ny POCT26,27.Ny mekanika mitondra azy dia mahasoa satria azo fehezina amin'ny alàlan'ny fanitsiana ny hafainganam-pandehan'ny fihodinana.Na izany aza, ny tsy fahampiana dia ny herin'ny centrifugal dia mitodika hatrany amin'ny sisiny ivelany amin'ny fitaovana, ka sarotra ny mampihatra ny fanehoan-kevitra maromaro ilaina amin'ny famakafakana sarotra kokoa.Na dia misy hery mitondra fiara fanampiny (oh capillaries 28, 29 sy ny maro hafa 30, 31, 32, 33, 34, 35) ankoatra ny hery centrifugal dia ampidirina amin'ny dosing multifunctional, dia mbola mety hitranga ny famindrana rano tsy ampoizina satria ireo hery fanampiny ireo dia baiko amin'ny ankapobeny. ambany noho ny herin'ny centrifugal, ka mahatonga azy ireo hahomby amin'ny faritra kely miasa na tsy misy amin'ny fangatahana miaraka amin'ny famoahana ranon-javatra.Ny fampidirana ny fanodikodinana pneumatic amin'ny microfluidics centrifugal toy ny fomba kinetika centrifugal 36, 37, 38, fomba thermopneumatic 39 ary fomba pneumatic mavitrika 40 dia voaporofo fa safidy manintona.Miaraka amin'ny fomba counterfugodynamic, lavaka fanampiny sy microchannels mampifandray dia ampidirina ao amin'ny fitaovana ho an'ny hetsika ivelany sy anatiny, na dia miankina amin'ny isan'ny tsingerin'ny paompy sy ny viscosity aza ny fahombiazan'ny pumping (amin'ny 75% ka hatramin'ny 90%). ny ranon-javatra.Ao amin'ny fomba thermopneumatic, ny fonon'ny latex sy ny efitra fifindran'ny fluid dia natao manokana hamehezana na hanokatra indray ny fidirana rehefa mafana na mangatsiaka ny haavon'ny rivotra voafandrika.Na izany aza, ny fametrahana fanafanana / fampangatsiahana dia mampiditra olana miadana valiny ary mametra ny fampiasana azy amin'ny fitsirihana thermosensitive (ohatra, polymerase chain reaction (PCR) amplification).Miaraka amin'ny fomba fiasa pneumatic mavitrika, ny famotsorana amin'ny fangatahana sy ny hetsika anatiny dia tratra amin'ny alàlan'ny fampiharana miaraka amin'ny tsindry tsara sy ny hafainganam-pandehan'ny fihodinana mifanandrify tsara amin'ny maotera haingam-pandeha.Misy fomba mahomby hafa tsy mampiasa afa-tsy ny pneumatic actuators (positive pressure 41, 42 na négatif pressure 43) sy ny valva mihidy mahazatra.Amin'ny alalan'ny fanerena misesy ao amin'ny efitrano pneumatic, ny ranon-javatra dia paompy nandroso peristaltically, ary ny valva mihidy ara-dalàna manakana ny backflow ny ranon-javatra noho ny peristalsis, dia toy izany no mahatsapa ny saro-pady fandidiana.Na izany aza, amin'izao fotoana izao dia tsy misy afa-tsy ny teknolojia microfluidic voafetra izay afaka manatanteraka fandidiana ranon-javatra sarotra amin'ny fitaovana POCT tokana, ao anatin'izany ny famoahana multifunctional, famotsorana amin'ny fangatahana, fampisehoana azo antoka, fitahirizana maharitra, fikarakarana ranon-javatra avo lenta, ary ny famokarana lafo vidy.Samy miaraka.Ny tsy fisian'ny asa fiasa maro dingana dia mety ho iray amin'ireo antony nahatonga ireo vokatra POCT ara-barotra vitsivitsy ihany toa ny Cepheid, Binx, Visby, Cobas Liat, ary Rhonda no nampidirina soa aman-tsara teo amin'ny tsena misokatra hatramin'izao.
Ato amin'ity lahatsoratra ity, dia manolotra pneumatic microfluidic actuator mifototra amin'ny maitso peratra micro switch teknolojia (FAST).FAST dia manambatra ny fananana ilaina rehetra amin'ny fotoana iray ho an'ny reagents isan-karazany manomboka amin'ny microliters ka hatramin'ny milliliters.FAST dia misy fonon'ny elastika, lever ary sakana.Raha tsy misy ny fanerena rivotra, ny membranes, levers ary ny sakana dia azo mihidy mafy ary ny rano ao anatiny dia azo tehirizina mandritra ny fotoana maharitra.Rehefa ampiharina sy amboarina amin'ny halavan'ny lever ny fanerena mety, dia mivelatra ny diaphragm ary manosika ny lever ho eo amin'ny toerana malalaka, mamela ny fluid hivezivezy.Izany dia mamela ny fandrefesana ranon-javatra marobe amin'ny fomba cascade, simultaneous, sequential na mifantina.
Namolavola rafitra PCR mampiasa FAST izahay mba hamoahana valiny amin'ny santionany amin'ny fitiliana ny viriosy gripa A sy B (IAV sy IBV).Nahatratra ny fetra ambany kokoa amin'ny fitiliana (LOD) amin'ny 102 kopia / mL izahay, ny fitiliana multiplex dia nampiseho manokana ho an'ny IAV sy IBV ary namela ny virosy gripa.Ny valin'ny fitsapana klinika amin'ny fampiasana ny santionan'ny nasal swab avy amin'ny marary 18 sy ny olona salama 18 dia mampiseho mifanaraka tsara amin'ny hamafin'ny fluorescence miaraka amin'ny RT-PCR mahazatra (pearson coefficients> 0.9).Ny valin'ny fitsapana klinika amin'ny fampiasana ny santionan'ny nasal swab avy amin'ny marary 18 sy ny olona salama 18 dia mampiseho mifanaraka tsara amin'ny hamafin'ny fluorescence miaraka amin'ny RT-PCR mahazatra (pearson coefficients> 0.9).Результати клинических испытаний с использованием образца мазка из носа avy amin'ny 18 пациентов и 18 здоровых лицитка нтенсивности флуоресценции стандартной ОТ-ПЦР (коэффициенты Пирсона > 0,9).Ny valin'ny fitsapana klinika mampiasa santionany nasal swab avy amin'ny marary 18 sy ny olona salama 18 dia mampiseho fifanarahana tsara eo amin'ny hamafin'ny fluorescence amin'ny RT-PCR mahazatra (pearson's coefficients> 0.9).0.9) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Результати клинических испытаний с использованием образцов назальных мазков avy amin'ny 18 пациентов и 18 здоровых лице жду интенсивностью флуоресценции и стандартной ОТ-ПЦР (коэффициент Пирсона > 0,9).Ny valin'ny fitsapana klinika amin'ny fampiasana santionany nasal swab avy amin'ny marary 18 sy olona salama 18 dia nampiseho fifanarahana tsara teo amin'ny hamafin'ny fluorescence sy ny RT-PCR mahazatra (pearson's coefficient > 0.9).Ny vidin'ny akora tombanana ho an'ny fitaovana FAST-POCT dia eo amin'ny US$1 eo ho eo (Tabilao fanampiny 1) ary azo ahena bebe kokoa amin'ny fampiasana fomba fanamboarana lehibe (ohatra ny famolahana tsindrona).Raha ny marina, ny fitaovana POCT miorina amin'ny FAST dia manana ny endri-javatra ilaina rehetra nomen'ny OMS ary mifanaraka amin'ny fomba fitiliana biochemika vaovao toy ny plasma thermal cycling44, immunoassays45 tsy misy fanamafisam-peo ary fitsapana fampiasa nanobody46 izay fototry ny rafitra POCT.mety.
Ao amin'ny fig.Ny 1a dia mampiseho ny firafitry ny sehatra FAST-POCT, izay misy efitra efatra misy ranon-javatra: efitra fitehirizana mialoha, efitra fangaro, efitrano fanehoan-kevitra, ary efitra fako.Ny fanalahidin'ny fanaraha-maso ny fikorianan'ny fluid dia ny endrika FAST (misy membranes elastika, lever ary sakana) hita ao amin'ny efitrano fitehirizana mialoha sy ny efitrano fampifangaroana.Amin'ny maha fomba fiasa pneumatika, ny endrika FAST dia manome fanaraha-maso mazava tsara ny fikorianan'ny fluid, ao anatin'izany ny fanodinkodinana mihidy/misokatra, fatra maro isan-karazany, famotsorana ranon-javatra amin'ny fangatahana, fampandehanana azo itokisana (ohatra, tsy fahatsapan-tena amin'ny fihovitrovitry ny tontolo iainana), ary fitehirizana maharitra.Ny sehatra FAST-POCT dia misy sosona efatra: sosona aoriana, sarimihetsika elastika, sarimihetsika plastika, ary sosona rakotra, araka ny aseho amin'ny fijery mihalehibe ao amin'ny sary 1b (aseho amin'ny antsipiriany ao amin'ny sary fanampiny S1 sy S2). ).Ny fantsona rehetra sy ny efitrano fitaterana ranon-javatra (toy ny efitrano fitehirizana mialoha sy ny fanehoan-kevitra) dia tafiditra ao anaty substrate PLA (asidra polylactic) manomboka amin'ny 0,2 mm (ampahany manify) hatramin'ny 5 mm matevina.Ny fitaovana sarimihetsika elastika dia PDMS matevina 300 µm izay mora mivelatra rehefa ampiharina ny tsindry amin'ny rivotra noho ny "hateviny manify" sy ny modulus ny elasticité ambany (eo amin'ny 2.25 MPa47 eo ho eo).Ny sosona sarimihetsika polyethylene dia vita amin'ny polyethylene terephthalate (PET) miaraka amin'ny hatevin'ny 100 µm mba hiarovana ny sarimihetsika elastika amin'ny fiovaovana tafahoatra noho ny fanerena rivotra.Mifanaraka amin'ny efi-trano, ny sosona substrate dia manana levers mifandray amin'ny fonony sosona (vita amin'ny PLA) amin'ny alalan'ny savily mba hifehy ny fikorianan'ny rano.Ny sarimihetsika elastika dia napetaka tamin'ny sosona ambadika tamin'ny fampiasana kasety adhesive misy sisiny roa (ARseal 90880) ary norakofana sarimihetsika plastika.Sosona telo no natambatra tamin'ny substrate iray tamin'ny fampiasana endrika T-clip tao amin'ny sosona fonony.Ny T-clamp dia misy elanelana eo anelanelan'ny tongotra roa.Rehefa nampidirina tao amin'ny lavaka ilay clip, dia niondrika kely ny tongotra roa, avy eo dia niverina tamin'ny toetrany voalohany ary namatotra mafy ny sarony sy ny lamosina rehefa nandalo tao amin'ny lavaka izy ireo (sary fanampiny S1).Ireo sosona efatra dia atambatra amin'ny fampiasana connecteurs.
Diagram schematic amin'ny lampihazo mampiseho ireo efitrefitra sy endri-javatra isan-karazany an'ny FAST.b Diagram lehibe amin'ny sehatra FAST-POCT.c Sarin'ny lampihazo eo akaikin'ny farantsa dolara amerikana.
Ny mekanika miasa amin'ny sehatra FAST-POCT dia aseho amin'ny sary 2. Ny singa manan-danja dia ny sakana eo amin'ny sosona fototra sy ny savily eo amin'ny fonon'ny fonony, izay miteraka endrika fitsabahana rehefa miangona ireo sosona efatra mampiasa endrika T .Rehefa tsy misy fanerena rivotra ampiharina (sary 2a), ny fitsabahana fitohanana mahatonga ny hinge hiondrika sy hiova endrika, ary ny famehezana hery dia ampiharina amin'ny alalan'ny lever mba hanery ny elastika sarimihetsika amin'ny sakana, ary ny ranon-javatra ao amin'ny tombo-kase lavaka dia voafaritra. toy ny fanjakana voaisy tombo-kase.Tsara homarihina fa amin'ity toe-javatra ity, ny lever dia miondrika ivelany, araka ny aseho amin'ny lafiny iray amin'ny sary 2a.Rehefa omena rivotra ny rivotra (sary 2b), dia mivelatra mivoaka mankany amin'ny fonony ny fonon'ny elastika ary manosika ny lever miakatra, ka manokatra ny elanelana eo amin'ny lever sy ny sakana hidiran'ny fluid ao amin'ny efitrano manaraka, izay voafaritra ho fanjakana misokatra. .Aorian'ny famotsorana ny fanerena rivotra, ny lever dia afaka miverina amin'ny toerany ary mijanona ho mafy orina noho ny elasticité ny hinge.Ny horonan-tsary momba ny hetsiky ny lever dia aseho amin'ny sarimihetsika fanampiny S1.
A. Skéma sy sary rehefa mikatona.Raha tsy misy ny tsindry dia manindry ny membrane amin'ny sakana ny lever, ary voaisy tombo-kase ny ranon-javatra.b Amin'ny toe-javatra tsara.Rehefa ampiharina ny fanerena, dia mivelatra ny membrane ary manosika ny lever miakatra, ka misokatra ny fantsona ary afaka mikoriana ny fluid.c Famaritana ny haben'ny toetran'ny fanerena mitsikera.Ny refy mampiavaka dia ahitana ny halavan'ny lever (L), ny elanelana misy eo amin'ny slider sy ny hinge (l) ary ny hatevin'ny fisondrotry ny lever (t).Fs dia ny hery fametahana eo amin'ny teboka throttle B. q dia ny enta-mavesatra zaraina mitovy amin'ny lever.Tx* dia maneho ny torque novolavolain'ny lever hinged.Ny tsindry mavesatra dia ny tsindry ilaina mba hampiakarana ny lever sy hampikoriana ny fluid.d vokatra ara-teorika sy andrana amin'ny fifandraisana misy eo amin'ny fanerena mitsikera sy ny haben'ny singa.n = 6 andrana tsy miankina no natao ary ny angona dia aseho ho ± fivilian-dàlana.Ny angona manta dia aseho ho rakitra angona manta.
Modely famakafakana mifototra amin'ny teorian'ny taratra novolavolaina mba hamakafaka ny fiankinan'ny fanerena manakiana Pc izay isokafan'ny banga amin'ny masontsivana geometrika (ohatra, L ny halavan'ny lever, l ny elanelana eo amin'ny sakana sy ny hinge, S dia lever Ny faritra mifandray amin'ny ranon-javatra t dia ny hatevin'ny fisondrotry ny lever, araka ny aseho amin'ny sary 2c).Araka ny antsipiriany ao amin'ny Fanamarihana Fanampiny sy ny sary fanampiny S3, dia misokatra ny elanelana rehefa \({P}_{c}\ge \frac{2{F}_{s}l}{SL}\), izay ny Fs no torsi. \ ({T}_{x}^{\ast}(={F}_{s}l)\) mba hanafoanana ny hery mifandray amin'ny fitsabahana ary mahatonga ny savily hiforitra.Ny valin'ny fanandramana sy ny modely famakafakana dia mampiseho fifanarahana tsara (sary 2d), mampiseho fa mitombo ny tsindry mafy Pc amin'ny fitomboan'ny t / l sy ny fihenan'ny L, izay hazavain'ny modely beam klasika, izany hoe mitombo ny torsi amin'ny t / Lift .Noho izany, ny famakafakana teorika ataontsika dia mampiseho mazava fa ny tsindry mitsikera dia azo fehezina amin'ny fomba mahomby amin'ny fanitsiana ny halavan'ny lever L sy ny t / l ratio, izay manome fototra manan-danja amin'ny famolavolana ny sehatra FAST-POCT.
Ny sehatra FAST-POCT dia manome dispensing multifunctional (aseho ao amin'ny Figure 3a miaraka amin'ny inset sy experiment), izay singa manan-danja indrindra amin'ny POCT mahomby, izay ahafahan'ny fluid mikoriana amin'ny lalana rehetra sy amin'ny filaharana rehetra (cascade, simultaneous, sequential) na multichannel mifantina. famoahana .- asa dosing.Ao amin'ny fig.3a(i) dia mampiseho ny fomba fatra-pamokarana izay misy efitra roa na maromaro mikoriana mampiasa sakana hanasarahana ireo reactant isan-karazany sy lever hifehy ny fanjakana misokatra sy mihidy.Rehefa ampiharina ny tsindry, dia mikoriana avy any ambony mankany amin'ny efitrano ambany amin'ny fomba cascade ny ranon-javatra.Marihina fa ny efitrano cascade dia azo fenoina amin'ny akora simika mando na simika maina toy ny vovoka lyophilized.Ao amin'ny fanandramana amin'ny sary 3a(i), ny ranomainty mena avy amin'ny efitrano ambony dia mikoriana miaraka amin'ny vovoka loko manga (sulphate varahina) mankany amin'ny efitrano faharoa ary mivadika manga maizina rehefa tonga any amin'ny efitrano ambany.Izy io koa dia mampiseho ny fanerena fanaraha-maso ho an'ny tsiranoka arotsaka.Toy izany koa, rehefa mifandray amin'ny efi-trano roa ny lever iray, dia lasa fomba fanindronana miaraka, araka ny asehon'ny sary.3a(ii), izay ahafahan'ny rano miparitaka amin'ny efitra roa na mihoatra rehefa ampiharina.Koa satria miankina amin'ny halavan'ny lever ny fanerena tsikera, ny halavan'ny lever dia azo ovaina mba hahazoana lamina tsindrona misesy araka ny asehon'ny sary.3a(iii).Lever lava (miaraka amin'ny fanerena mivaingana Pc_long) no mifandray amin'ny efi-trano B ary ny lever fohy (miaraka amin'ny tsindry mitsikera Pc_short > Pc_long) dia nampifandraisina tamin'ny efitrano A. Rehefa nampidirina ny tsindry P1 (Pc_long < P1 < Pc_short), dia ilay ranon-javatra mena ihany no nampidirina. dia afaka mikoriana mankany amin'ny efitrano B ary rehefa nitombo ny tsindry ho P2 (> Pc_short), ny rano manga dia afaka mikoriana mankany amin'ny efitrano A. Ity fomba fanindronana manaraka ity dia mihatra amin'ny ranon-javatra samihafa mamindra any amin'ny efitranony mifandraika amin'ny filaharana, izay tena ilaina amin'ny POCT mahomby. fitaovana.Lever lava (miaraka amin'ny fanerena mivaingana Pc_long) no mifandray amin'ny efi-trano B ary ny lever fohy (miaraka amin'ny tsindry mitsikera Pc_short > Pc_long) dia nampifandraisina tamin'ny efitrano A. Rehefa nampidirina ny tsindry P1 (Pc_long < P1 < Pc_short), dia ilay ranon-javatra mena ihany no nampidirina. dia afaka mikoriana mankany amin'ny efitrano B ary rehefa nitombo ny tsindry ho P2 (> Pc_short), ny rano manga dia afaka mikoriana mankany amin'ny efitrano A. Ity fomba fanindronana manaraka ity dia mihatra amin'ny ranon-javatra samihafa mamindra any amin'ny efitranony mifandraika amin'ny filaharana, izay tena ilaina amin'ny POCT mahomby. fitaovana.Длинный рычаг (с критическим давлением Pc_long) был соединен с камерой B, а короткий рычаг (с критическим давл_short) ен с камерой A. При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) только жидкость, выделенная красным может течь в камеру B, и когда давление было увеличено до P2 (> Pc_short), синяя жидкость может течь в камеру течь в камеру тельмим няется к различным жидкостям, последовательно перемещаемым в соответствующие камеры, что имеет решающение перемещаемым в соответствующие камеры, что имеет решающение шающение с.Lever lava (miaraka amin'ny fanerena mitsikera Pc_long) no mifandray amin'ny efitrano B, ary ny lever fohy (miaraka amin'ny tsindry mitsikera Pc_short > Pc_long) dia mifandray amin'ny efitrano A. Rehefa ampiharina ny tsindry P1 (Pc_long < P1 < Pc_short), dia ny rano ihany no asongadina. amin'ny mena dia afaka mikoriana ao amin'ny efitrano B, ary rehefa nitombo ny tsindry ho P2 (> Pc_short), ny rano manga dia afaka mikoriana ao amin'ny efitrano A. Ity fomba tsindrona misesy ity dia ampiharina amin'ny tsiranoka samihafa afindra amin'ny efi-trano tsirairay avy, izay tena zava-dehibe. ho an'ny POCT mahomby.fitaovana. Длинный рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камерой B, а короткий рычаг (критическое давление Pc_long) соединен с камерой B, а короткий рычаг (критическое давление давление Pc.Ny sandry lava (pressure critique Pc_long) dia mifandray amin'ny chambre B ary ny sandry fohy (critical pressure Pc_short > Pc_long) dia mifandray amin'ny chambre A.При приложении давления P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) amin'ny камеру B может поступать только красная жидкость, а при увеличели и при увеличени 2 еру A может поступать синяя жидкость.Rehefa ampiharina ny tsindry P1 (Pc_long <P1 <Pc_short), ranon-javatra mena ihany no afaka miditra ao amin'ny efitrano B, ary rehefa mitombo ny tsindry ho P2 (> Pc_short), dia afaka miditra ao amin'ny efitrano A ny ranon-javatra manga. ranon-javatra isan-karazany ao amin'ny efitrano tsirairay, izay tena zava-dehibe amin'ny fahombiazan'ny fitaovana POCT.Ny sary 3a(iv) dia mampiseho ny fomba fanindronana mifantina, izay misy ny efi-trano lehibe manana fohy (miaraka amin'ny tsindry mitsikera Pc_short) ary ny lava lava (miaraka amin'ny tsindry mitsikera Pc_long <Pc_short) izay mifandray amin'ny efitrano A sy efitra B, ankoatra izany mankany amin'ny fantsona rivotra hafa mifandray amin'ny efitrano B. Mba hamindrana ny ranon-javatra ho any amin'ny efitrano A voalohany, ny tsindry P1 (Pc_long < P1 < Pc_short) sy P2 (P2> P1) miaraka amin'ny P1 + P2 > Pc_short dia nampiharina tamin'ny fitaovana tamin'ny fotoana iray ihany.Ny sary 3a(iv) dia mampiseho ny fomba fanindronana mifantina, izay misy ny efi-trano lehibe manana fohy (miaraka amin'ny tsindry mitsikera Pc_short) ary ny lava lava (miaraka amin'ny tsindry mitsikera Pc_long P1) miaraka amin'ny P1 + P2 > Pc_short dia nampiharina tamin'ny fitaovana tamin'ny fotoana iray ihany.Ao amin'ny fig.3а(iv) показан режим селективного впрыска, при котором основная камера имела короткий (с критическим давлением ледин) ским давлением Pc_long < Pc_short), которые дополнительно соединялись с камерой A и камерой B соответственно.Ny 3a(iv) dia mampiseho ny fomba fanindronana mifantina, izay misy ny efi-trano lehibe (miaraka amin'ny tsindry mitsikera Pc_short) ary ny lever lava (miaraka amin'ny tsindry mitsikera Pc_long P1), ary P1 + P2 > Pc_short.mankany amin'ny fantsona rivotra hafa mifandray amin'ny efitrano B. Mba handefasana ranon-javatra voalohany mankany amin'ny efitrano A, ny tsindry P1 (Pc_long P1) dia nampiharina tamin'ny fitaovana, izay misy ny P1 + P2> Pc_short. 3а(iv) показан режим селективного впрыска, когда основная камера имеет короткий стержень (с критическим ставленим (с критическим давлением Pc_long < Pc_short), соединенные с камерой A и камерой B соответственно, и в дополнение к друмус подключенному к комнате B.3a(iv) dia mampiseho ny fomba tsindrona voafantina rehefa ny efi-trano lehibe dia manana taho fohy (kritika tsindry Pc_short) sy ny lava taho (kritika tsindry Pc_long <Pc_short) mifandray amin'ny efitra A sy efitra B tsirairay avy, ary ho fanampin'ny rivotra hafa andalana, mifandray amin'ny efitrano B.Noho izany, ny P2 dia manakana ny rano tsy hiditra ao amin'ny efitrano B;Mandritra izany fotoana izany, ny totalin'ny fanerena P1 + P2 dia nihoatra ny fanerena mitsikera mba hampavitrika ny lever fohy kokoa mifandray amin'ny efitra A mba hamela ny rano mikoriana ao amin'ny efitra A. Avy eo, rehefa ilaina ny efitra B mba ho feno, dia mila mampihatra P1 ihany (Pc_long < P1 < Pc_short) ao amin'ny efi-trano lehibe mba hampavitrika ny lever lava sy hamela ny ranon-javatra mikoriana mankany amin'ny efitra B. Azo jerena mazava tsara manomboka amin'ny fotoana t = 3 s ka hatramin'ny 9 s fa ny ranon-javatra ao amin'ny efitra A dia nijanona tsy tapaka raha nitombo tao amin'ny efitrano. B rehefa nampiharina ny tsindry P1.Mandritra izany fotoana izany, ny totalin'ny fanerena P1 + P2 dia nihoatra ny fanerena mitsikera mba hampavitrika ny lever fohy kokoa mifandray amin'ny efitra A mba hamela ny rano mikoriana ao amin'ny efitra A. Avy eo, rehefa ilaina ny efitra B mba ho feno, dia mila mampihatra P1 ihany (Pc_long < P1 < Pc_short) ao amin'ny efi-trano lehibe mba hampavitrika ny lever lava sy hamela ny ranon-javatra mikoriana mankany amin'ny efitra B. Azo jerena mazava tsara manomboka amin'ny fotoana t = 3 s ka hatramin'ny 9 s fa ny ranon-javatra ao amin'ny efitra A dia nijanona tsy tapaka raha nitombo tao amin'ny efitrano. B rehefa nampiharina ny tsindry P1.Между тем, общее давление P1 + P2 превысило критическое давление, чтобы активировать более короткий рычаг, сонечаг волить жидкости течь в камеру A. Затем, когда требуется заполнить камеру B, нам нужно только применить P1 (Pc_long < P1 < P1 ) в основной камере, чтобы активировать длинный рычаг и дать жидкости течь в камеру B идкость в камере A оставалась постоянной, в то время как в камере она увеличивалась.Mandritra izany fotoana izany, ny totalin'ny fanerena P1 + P2 dia nihoatra ny fanerena mitsikera mba hampavitrika lever fohy kokoa mifandray amin'ny efitra A mba hamela ranon-javatra mikoriana ao amin'ny efitrano A. Avy eo rehefa mila fenoina efitra B dia mila mampihatra P1 (Pc_long Mandritra izany fotoana izany, ny totalin'ny fanerena P1 + P2 dia mihoatra ny fanerena mitsikera, manetsika ny lever kely kokoa mampifandray ny efitrano A, mamela ny fluid hikoriana ao amin'ny efitrano A.Rehefa tonga ny fotoana hamenoana ny efitrano A, dia ampiharo fotsiny ny P1 ao amin'ny efitrano lehibe ary ny P2 ao amin'ny efitrano faharoa.Amin'izany fomba izany, ny fitondran-tena mikoriana dia azo afindra amin'ny fakantsary A sy B. Ny fihetsika mikoriana amin'ireo fomba fizarana efatra miasa maro dia hita ao amin'ny sarimihetsika fanampiny S2.
a fanoharana momba ny asa maro, izany hoe (i) cascading, (ii) simultaneous, (iii) sequential, ary (iv) fifantenana andraikitra.Ny curves dia maneho ny fizotran'ny asa sy ny mason'ireo fomba fizarana efatra ireo.b Vokatry ny fitsapana fitehirizana maharitra amin'ny rano deionized sy ethanol.n = 5 andrana tsy miankina no natao ary ny angona dia aseho ho ± sd c.Fampisehoana fitsapana fahatoniana rehefa ao amin'ny (i) static sy (ii) vibrating ny fitaovana FAST sy ny fitaovana kapila (CV).(iii) Volana vs. fotoana ho an'ny fitaovana FAST sy CV amin'ny frequence angular isan-karazany.d Famoahana ny valin'ny fitsapana amin'ny fangatahana (i) fitaovana FAST sy (ii) fitaovana CV.(iii) Fifandraisana eo amin'ny volume sy ny fotoana ho an'ny fitaovana FAST sy CV mampiasa fomba fanerena miato.Ny bara rehetra, 1 cm.Ny angona manta dia omena ho rakitra angona manta.
Ny fitehirizana maharitra ny reagents dia singa manan-danja iray hafa amin'ny fitaovana POCT mahomby izay ahafahan'ny mpiasa tsy voaofana mitantana reagents maro.Na dia maro aza ny teknolojia efa naneho ny mety ho fitehirizana maharitra (oh: microdispenseur 35, fonosana blister 48 ary kitapo hazo 49), dia ilaina ny efitrano fandraisana manokana mba handraisana ilay fonosana, izay mampitombo ny vidiny sy ny fahasarotana;Ankoatr'izay, ireo rafitra fitahirizana ireo dia tsy mamela ny famoahana araka ny fangatahana ary miteraka fandaniam-poana ny reagents noho ny ambiny ao anaty fonosana.Ny fahaiza-manao fitahirizana maharitra dia nohamarinina tamin'ny alàlan'ny fanaovana fitiliana ny fiainana haingana amin'ny fampiasana fitaovana PMMA vita amin'ny CNC noho ny faharatsiany kely sy ny fanoherana ny fidiran'ny entona (sary fanampiny S5).Ny fitaovana fitsapana dia feno rano deionized (rano deionized) sy ethanol 70% (simulating reagents volatile) amin'ny 65 ° C mandritra ny 9 andro.Na ny rano deionized sy ny ethanol dia voatahiry amin'ny alàlan'ny foil aluminium mba hanakanana ny fidirana avy any ambony.Ny fampitoviana Arrhenius sy ny angovo fampahavitrihana fidirana voalaza ao amin'ny literatiora50,51 dia nampiasaina mba hanombanana ny mitovy amin'ny fotoana tena izy.Ao amin'ny fig.Ny 3b dia mampiseho ny salan'isa vokatry ny fahaverezan'ny lanja ho an'ny santionany 5 voatahiry amin'ny 65 ° C mandritra ny 9 andro, mitovy amin'ny 0,30% ho an'ny rano deionized ary 0,72% ho an'ny ethanol 70% mandritra ny 2 taona amin'ny 23 ° C.
Ao amin'ny fig.Ny 3c dia mampiseho ny fitsapana vibration.Satria ny valva capillary (CV) no fomba fitantanana ranoka malaza indrindra amin'ireo fitaovana POCT28,29 efa misy, fitaovana CV 300 µm ny sakany ary 200 µm lalina no nampiasaina ho fampitahana.Hita fa rehefa mijanona ny fitaovana roa, dia mihidy ny fluid ao amin'ny sehatra FAST-POCT sy ny fluid ao amin'ny fitaovana CV noho ny fanitarana tampoka ny fantsona, izay mampihena ny herin'ny kapila.Na izany aza, rehefa mitombo ny fatran'ny angular vibrator orbital, dia mijanona ho voaisy tombo-kase ny fluid ao amin'ny sehatra FAST-POCT, fa ny fluid ao amin'ny fitaovana CV dia mikoriana mankany amin'ny efitrano ambany (jereo koa ny Sarimihetsika fanampiny S3).Izany dia manolo-kevitra fa ny savily deformable amin'ny sehatra FAST-POCT dia afaka mampihatra hery mekanika matanjaka amin'ny maody mba hanidy mafy ny rano ao amin'ny efitrano.Na izany aza, amin'ny fitaovana CV, ny rano dia tazonina noho ny fifandanjana eo amin'ny dingan'ny solida, ny rivotra ary ny ranon-javatra, miteraka tsy fandriam-pahalemana, ary ny fihovitrovitra dia mety hanelingelina ny fifandanjana ary miteraka fihetsika tsy ampoizina.Ny tombony amin'ny sehatra FAST-POCT dia ny manome fiasa azo itokisana ary misoroka ny tsy fahombiazana amin'ny fisian'ny vibration izay matetika mitranga mandritra ny fandefasana sy ny fandidiana.
Ny endri-javatra manan-danja iray hafa amin'ny sehatra FAST-POCT dia ny famoahana azy amin'ny fangatahana, izay fepetra takiana amin'ny famakafakana quantitative.Ao amin'ny fig.3d dia mampitaha ny famoahana amin'ny fangatahana ny sehatra FAST-POCT sy ny fitaovana CV.Avy amin'ny aviavy.3d(iii) hitantsika fa ny fitaovana FAST dia mamaly haingana ny mari-pamantarana tsindry.Rehefa nampiharina tamin'ny sehatra FAST-POCT ny tsindry, dia nikoriana ny fluid, rehefa navoaka ny tsindry dia nijanona avy hatrany ny fikorianan'ny rano (sary 3d (i)).Ity hetsika ity dia azo hazavaina amin'ny alàlan'ny fiverenan'ny elastika haingana amin'ny hinge, izay manindry ny lever hiverina amin'ny sakana, manidy ny efitrano.Na izany aza, dia nitohy nikoriana tao amin'ny fitaovana CV ny ranoka, ary tamin'ny farany dia niteraka tsiranoka tsy nampoizina teo amin'ny 100 µl teo ho eo taorian'ny namoahan'ny tsindry (sary 3d(ii) sy Sarimihetsika fanampiny S4).Izany dia azo hazavaina amin'ny fanjavonan'ny fiantraikan'ny kapilara pinning rehefa mando tanteraka ny CV aorian'ny tsindrona voalohany.
Mbola fanamby ho an'ny fampiharana POCT ny fahaizana mitantana ny ranon-javatra misy hafanana sy viscosity amin'ny fitaovana mitovy.Ny tsy fahampian-drano dia mety hitarika amin'ny fivoahana na fihetsika tsy ampoizina hafa ao amin'ny fantsona, ary ny fitaovana fanampiny toy ny vortex mixer, centrifuges ary sivana dia ilaina matetika mba hanomanana ranon-javatra be viscous 52 .Nosedrainay ny fifandraisana misy eo amin'ny tsindry mivaivay sy ny fananana ranon-javatra (miaraka amin'ny fahaleovan-tena sy ny viscosity isan-karazany).Ny valiny dia aseho amin'ny tabilao 1 sy Video S5.Hita fa azo fehezina ao amin'ny efitrano ny ranon-javatra misy hafanana sy viscosity samihafa, ary rehefa ampiharina ny tsindry, na ny ranon-javatra misy viscosity hatramin'ny 5500 cP aza dia azo afindra any amin'ny efitrano mifanila, izay ahafahana mamantatra ny santionany amin'ny avo. viscosity (izany hoe sputum, santionany tena viscous ampiasaina amin'ny fitiliana aretina taovam-pisefoana).
Amin'ny alàlan'ny fampifangaroana ireo fitaovana fanaparitahana multifunctional etsy ambony, dia azo amboarina ireo fitaovana POCT mifototra amin'ny FAST.Ny ohatra iray dia aseho amin'ny sary 1. Ny orinasa dia misy efitrano fitehirizana mialoha, efitrano fampifangaroana, efitrano fanehoan-kevitra ary efitrano fako.Ny reagents dia azo tehirizina ao amin'ny efitrano fitehirizana mialoha mandritra ny fotoana maharitra ary avy eo dia alefa any amin'ny efitrano fangaro.Miaraka amin'ny fanerena mety, ireo reactants mifangaro dia azo afindra amin'ny efitrano fako na efitrano fanehoan-kevitra.
Satria ny fitiliana PCR no fenitry ny volamena hamantarana ny otrikaretina toy ny H1N1 sy ny COVID-19 ary misy dingana fanehoan-kevitra maro, dia nampiasa ny sehatra FAST-POCT ho an'ny fitiliana PCR ho fampiharana izahay.Ao amin'ny fig.4 dia mampiseho ny fizotry ny fitiliana PCR mampiasa ny sehatra FAST-POCT.Voalohany, ny eluting reagent, andriamby microbead reagent, fanasan'ny vahaolana A, ary ny fanasan'ny vahaolana W dia pipetted ho mialoha fitehirizana efitra E, M, W1 sy W2, tsirairay avy.Ny dingan'ny adsorption RNA dia aseho amin'ny sary.4a ary toy izao manaraka izao: (1) rehefa ampiharina ny tsindry P1 (= 0,26 bar), ny santionany dia mihetsika ao amin'ny efitrano M ary avoaka ao amin'ny efitrano fangaro.(2) Ny tsindry rivotra P2 (= 0,12 bar) dia omena amin'ny alàlan'ny seranana A mifandray amin'ny faran'ny efitrano fangaro.Na dia misy fomba fampifangaroana maromaro aza no naneho ny fahaizany mampifangaro ranon-javatra amin'ny sehatra POCT (ohatra ny fampifangaroana serpentine 53, fampifangaroana kisendrasendra 54 ary fampifangaroana batch 55), dia mbola tsy mahafa-po ny fahombiazany sy ny fahombiazany.Izy io dia mampiasa ny fomba fampifangaroana bubble, izay ampidirina amin'ny faran'ny efitrano fampifangaroana ny rivotra mba hamoronana bubbles ao anaty rano, ary aorian'izay dia afaka mampifangaro tanteraka ao anatin'ny segondra ny vortex mahery.Ny fanandramana fampifangaroana bubble dia natao ary ny valiny dia aseho amin'ny sary fanampiny S6.Hita fa rehefa asiana fanerena 0,10 bar dia 8 segondra eo ho eo ny fifangaroana tanteraka.Amin'ny fampitomboana ny fanerena ho 0.20 bar, ny fampifangaroana tanteraka dia vita ao anatin'ny 2 segondra eo ho eo.Ny fomba kajy ny fahombiazan'ny fampifangaroana dia aseho ao amin'ny fizarana Methods.(3) Mampiasà andriamby rubidium hanesorana ireo vakana, avy eo tsindriana ny P3 (= 0,17 bar) amin'ny seranana P mba hamindra ireo reagents ao amin'ny efitrano fako.Ao amin'ny fig.4b,c dia mampiseho ny dingana fanasan-damba hanesorana ny loto avy amin'ny santionany toy izao manaraka izao: (1) Ny vahaolana fanasan-damba A avy amin'ny efitrano W1 dia avoaka ao amin'ny efitrano fampifangaroana tsindry P1.(2) Avy eo dia ataovy ny dingana fampifangaroana bubble.(3) Ny vahaolana fanasan-damba A dia nafindra tany amin'ny efitrano fako fako, ary ny microbeads ao amin'ny efitrano fangaro dia esorina amin'ny andriamby.Ny fanasana W (sary 4c) dia mitovy amin'ny fanasana A (sary 4b).Marihina fa indroa no nanaovana ny dingana fanasan-damba A sy W.Ny sary 4d dia mampiseho ny dingana elution hanalana ny RNA avy amin'ny vakana;ny elution sy ny fampifangaroana dingana fampidirana dia mitovy amin'ny RNA adsorption sy ny fanasana dingana voalaza etsy ambony.Satria ny reagents elution dia nafindra tao amin'ny efitrano fanehoan-kevitra PCR eo ambany fanerena P3 sy P4 (= 0.23 bar), dia tonga ny tsindry mafy mba hamehezana ny sandrin'ny efitrano fanehoan-kevitra PCR.Toy izany koa, ny fanerena P4 dia manampy amin'ny famehezana ny lalana mankany amin'ny efitrano fako.Noho izany, ny reagents elution rehetra dia nozaraina mitovy amin'ireo efitrano fanehoan-kevitra PCR efatra mba hanombohana ny fanehoan-kevitra PCR multiplex.Ny fomba fiasa etsy ambony dia aseho ao amin'ny Sarimihetsika fanampiny S6.
Ao amin'ny dingana adsorption RNA, ny santionany dia ampidirina ao amin'ny fidirana M ary manindrona ao amin'ny efitrano fampifangaroana miaraka amin'ny vahaolana vakana voatahiry teo aloha.Aorian'ny fampifangaroana sy ny fanesorana ny granules, ny reagents dia zaraina ao amin'ny efitrano fako.b sy c manasa dingana, ampidiro isan-karazany ny fanasan-damba efa voatahiry ao amin'ny efitra fampifangaroana, ary aorian'ny fampifangaroana sy ny fanesorana ny vakana, hamindra ny reagents ho any amin'ny efitra fako ranon-javatra.d Dingan'ny elution: Rehefa avy nampidirina ny reagents elution, ny fampifangaroana ary ny fitrandrahana vakana, dia afindra any amin'ny efitrano fanehoan-kevitra PCR ireo reagents.Ny curves dia mampiseho ny fizotran'ny asa sy ny masontsivana mifandraika amin'ny dingana isan-karazany.Ny tsindry dia ny tsindry atao amin'ny alàlan'ny efitrano tsirairay.Ny volume dia ny habetsahan'ny ranon-javatra ao amin'ny efitrano fangaro.Ny savaivony rehetra dia 1 cm.Ny angona manta dia omena ho rakitra angona manta.
Ny fomba fitiliana PCR dia natao ary ny sary fanampiny S7 dia manolotra ny mombamomba ny hafanana ao anatin'izany ny 20 minitra amin'ny fotoana fanodinana mivadika ary 60 minitra amin'ny fotoana fihodinana mafana (95 sy 60 ° C), miaraka amin'ny tsingerina mafana iray dia 90 s (Silmie fanampiny S7)..FAST-POCT dia mitaky fotoana kely kokoa hamitana tsingerina mafana iray (90 segondra) noho ny RT-PCR mahazatra (180 segondra ho an'ny tsingerina mafana iray).Izany dia azo hazavaina amin'ny alàlan'ny velaran-tany avo amin'ny tahan'ny volume sy ny tsy fahampian'ny hafanana ambany amin'ny efitrano fanehoan-kevitra micro-PCR.Ny velaran'ny efitrano dia 96.6 mm2 ary ny haben'ny efitrano dia 25 mm3, ka mahatonga ny haavon'ny haavony eo amin'ny 3.86 eo ho eo.Araka ny hita ao amin'ny sary fanampiny S10, ny faritra fitsapana PCR amin'ny lampihazo misy antsika dia misy lavaka eo amin'ny tontonana aoriana, ka mahatonga ny fanambanin'ny efitrano PCR 200 µm matevina.Misy pad elastika conductive thermally mipetaka amin'ny tampon'ny fanafanana amin'ny fanaraha-maso ny mari-pana, miantoka ny fifandraisana mafy amin'ny lamosin'ny boaty fitsapana.Mampihena ny inersia mafana amin'ny sehatra izany ary manatsara ny fahombiazan'ny fanafanana / fampangatsiahana.Mandritra ny fihodinana mafana dia mitsonika ny paraffine ao anaty lampihazo ary mikoriana ao amin'ny efitrano fanehoan-kevitry ny PCR, miasa ho toy ny tombo-kase mba hisorohana ny etona reagent sy ny fandotoana ny tontolo iainana (jereo ny Sarimihetsika fanampiny S8).
Ny fizotry ny fizahana PCR rehetra voalaza etsy ambony dia mandeha ho azy tanteraka amin'ny fampiasana fitaovana FAST-POCT namboarina manokana, ahitana vondrona fanaraha-maso fanerena voaprograma, vondrona fitrandrahana magnetika, vondrona fanaraha-maso ny mari-pana, ary vondrona fisintonana sy fanodinana famantarana fluorescent.Marihina fa nampiasa ny sehatra FAST-POCT izahay ho an'ny fitokana-monina RNA ary avy eo dia nampiasa ny santionany RNA nalaina ho an'ny fanehoan-kevitra PCR tamin'ny fampiasana ny rafitra FAST-POCT sy ny rafitra PCR desktop ho fampitahana.Ny vokatra dia saika mitovy amin'ny aseho amin'ny sary fanampiny S8.Ny mpandraharaha dia manao asa tsotra: mampiditra ny santionany ao amin'ny M-chamber ary mampiditra ny lampihazo ao amin'ny fitaovana.Ny valim-panadinana be dia be dia azo ao anatin'ny 82 minitra eo ho eo.Ny fampahalalana amin'ny antsipiriany momba ny fitaovana FAST-POCT dia azo jerena ao amin'ny tarehimarika fanampiny.C9, C10 ary C11.
Ny gripa vokatry ny gripa A (IAV), B (IBV), C (ICV) ary D (IDV) dia tranga mahazatra maneran-tany.Amin'ireo, IAV sy IBV no tompon'andraikitra amin'ny tranga faran'izay mafy indrindra sy ny areti-mifindra isan-taona, izay mamindra ny 5-15% amin'ny mponina eran-tany, miteraka tranga mafy 3-5 tapitrisa ary miteraka 290,000-650,000 isan-taona.Aretina taovam-pisefoana56,57.Ny fitiliana mialoha ny IAV sy IB dia ilaina mba hampihenana ny aretina sy ny enta-mavesatry ny toekarena.Amin'ireo teknika diagnostika misy, ny réverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) dia heverina ho saro-pady, manokana ary marina (> 99%)58,59.Amin'ireo teknika diagnostika misy, ny réverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) dia heverina ho saro-pady, manokana ary marina (> 99%)58,59.Среди доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦер слести) специфичной и точной (> 99%)58,59.Amin'ireo fomba fitsaboana azo ampiasaina, ny valin'ny transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) dia heverina ho saro-pady indrindra, voafaritra ary marina (> 99%)58,59. Из доступных диагностических методов полимеразная цепная реакция с обратной транскриптазой (ОТ-ПЦР) считач специфичной и точной (>99%)58,59.Amin'ireo fomba diagnostika misy, ny reverse transcriptase polymerase chain reaction (RT-PCR) dia heverina ho saro-pady, voafaritra ary marina (> 99%)58,59.Na izany aza, ny fomba nentim-paharazana RT-PCR dia mitaky pipetting miverimberina, fampifangaroana, famoahana ary famindrana ranon-javatra, mametra ny fampiasana azy ireo amin'ny sehatra voafetra amin'ny loharanon-karena.Eto, ny sehatra FAST-POCT dia nampiasaina ho an'ny PCR detection ny IAV sy IBV, tsirairay avy, mba hahazoana ny fetra farany ambany (LOD).Fanampin'izany, ny IAV sy IBV dia novolavolaina mba hanavakavaka ny pathotypes isan-karazany manerana ny karazany, manome sehatra mampanantena ho an'ny famakafakana fototarazo sy ny fahafahana mitsabo tsara ny aretina.
Ao amin'ny fig.5a dia mampiseho ny valin'ny fitiliana HAV PCR amin'ny fampiasana 150 µl RNA virosy voadio ho santionany.Ao amin'ny fig.Ny 5a (i) dia mampiseho fa amin'ny fifantohana HAV amin'ny 106 copies / ml, ny haavon'ny fluorescence (ΔRn) dia mety hahatratra 0.830, ary rehefa mihena ny fifantohana amin'ny 102 copies / ml, dia mbola afaka mahatratra 0.365 ny ΔRn, izay mifanitsy amin'ny avo kokoa noho izany. an'ny vondrona mpanara-maso ratsy foana (0.002), avo 100 eo ho eo.Ho an'ny fandrefesana mifototra amin'ny fanandramana tsy miankina enina, ny curve calibration linear dia natsangana teo anelanelan'ny fifantohana amin'ny log sy ny tokonam-baravaran'ny tsingerina (Ct) an'ny IAV (sary 5a (ii)), R2 = 0.993, manomboka amin'ny 102-106 kopia / mL.ny vokatra dia mifanaraka tsara amin'ny fomba RT-PCR mahazatra.Ao amin'ny fig.5a(iii) dia mampiseho sary fluorescent amin'ny valin'ny fitsapana aorian'ny tsingerina 40 amin'ny sehatra FAST-POCT.Hitanay fa ny sehatra FAST-POCT dia afaka mamantatra ny HAV hatramin'ny 102 copies/mL.Na izany aza, ny fomba nentim-paharazana dia tsy manana sanda Ct amin'ny 102 copies/mL, ka mahatonga azy ho LOD eo amin'ny 103 copies/mL.Nihevitra izahay fa mety ho noho ny fahombiazan'ny fampifangaroana bubble izany.Ny fanandramana fitsapana PCR dia natao tamin'ny IAV RNA voadio mba hanombanana ny fomba fampifangaroana isan-karazany, anisan'izany ny fampifangaroana amin'ny shake (mitovy amin'ny fomba fampifangaroana amin'ny fomba mahazatra RT-PCR), fampifangaroana vial (io fomba io, 3 s amin'ny bar 0.12) ary tsy misy fampifangaroana ho vondrona mpanara-maso. ..Ny vokatra dia azo jerena ao amin'ny sary fanampiny S12.Hita fa amin'ny fifantohana RNA avo kokoa (106 kopia / mL), ny sanda Ct amin'ny fomba fampifangaroana samihafa dia saika mitovy amin'ny fampifangaroana bubble.Rehefa nidina ho 102 copies/mL ny fifantohan'ny RNA dia tsy nisy sanda Ct ny fifangaroana sy ny fanaraha-maso, raha mbola nanome sanda Ct 36.9 kosa ny fomba fampifangaroana bubble, izay teo ambanin'ny tokonam-baravaran'ny Ct 38. vesicles, izay naseho ihany koa tamin'ny literatiora hafa, izay mety hanazava ihany koa ny antony mahatonga ny fahatsapan'ny sehatra FAST-POCT avo kokoa noho ny RT-PCR mahazatra.Amin'ny aviavy.Ny 5b dia mampiseho ny valin'ny famakafakana PCR momba ny santionany IBV RNA voadio manomboka amin'ny 101 ka hatramin'ny 106 kopia / ml.Ny valiny dia mitovy amin'ny fitsapana IAV, nahatratra R2 = 0.994 ary LOD 102 kopia / mL.
famakafakana PCR momba ny viriosy gripa A (IAV) miaraka amin'ny fatran'ny IAV manomboka amin'ny 106 ka hatramin'ny 101 kopy/mL mampiasa TE buffer ho toy ny fanaraha-maso ratsy (NC).(i) Curve fluorescence amin'ny fotoana tena izy.(ii) Curve calibration linear eo anelanelan'ny logaritma IAV RNA concentration sy ny cycle threshold (Ct) ho an'ny FAST sy ny fomba fitiliana mahazatra.(iii) IAV FAST-POCT sary fluorescent taorian'ny tsingerina 40.b, fitiliana PCR ny viriosy gripa B (IBV) miaraka amin'ny (i) spectrum fluorescence amin'ny fotoana tena izy.(ii) curve calibration linear ary (iii) sary fluorescence FAST-POCT IBV taorian'ny cycles 40.Ny fetra ambany indrindra amin'ny fitiliana (LOD) ho an'ny IAV sy IBV mampiasa ny sehatra FAST-POCT dia 102 copies/mL, izay ambany noho ny fomba mahazatra (103 copies/mL).c Valin'ny fitsapana Multiplex ho an'ny IAV sy IBV.Ny GAPDH dia nampiasaina ho fanaraha-maso tsara ary ny buffer TE dia nampiasaina ho fanaraha-maso ratsy mba hisorohana ny fandotoana sy ny fanamafisam-peo.Karazana santionany efatra samihafa no azo avahana: (1) Santionany miiba GAPDH ihany (“IAV-/IBV-”);(2) aretina IAV (“IAV+/IBV-”) miaraka amin’ny IAV sy GAPDH;(3) aretina IBV (“IAV-/IBV+”) miaraka amin’ny IBV sy GAPDH;(4) aretina IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) miaraka amin’ny IAV, IBV ary GAPDH.Ny tsipika misy teboka dia maneho ny tsipika tokonam-baravarana.n = 6 andrana tsy miankina biolojika no natao, ny angon-drakitra dia aseho ho ± fivilian-dàlana.Ny angona manta dia aseho ho rakitra angona manta.
Ao amin'ny fig.5c dia mampiseho ny valin'ny fitsapana multiplexing ho an'ny IAV/IBV.Eto, ny viriosy lysate dia nampiasaina ho vahaolana santionany ho solon'ny RNA voadio, ary ny primer efatra ho an'ny IAV, IBV, GAPDH (fifehezana tsara) ary TE buffer (fifehezana ratsy) dia nampiana efitrano fanehoan-kevitra efatra samihafa amin'ny sehatra FAST-POCT.Ny fanaraha-maso tsara sy ratsy dia ampiasaina eto mba hisorohana ny mety ho fandotoana sy ny fanatsarana ny lamosina.Nozaraina ho vondrona efatra ny fitsapana: (1) santionany ratsy GAPDH (“IAV-/IBV-”);(2) IAV-infected (“IAV+/IBV-”) mifanohitra IAV sy GAPDH;(3) IBV-.voan'ny aretina (“IAV-”) -/IBV+”) IBV sy GAPDH;(4) aretina IAV/IBV (“IAV+/IBV+”) miaraka amin'ny IAV, IBV ary GAPDH.Amin'ny aviavy.5c dia mampiseho fa rehefa nampiharina ny santionany ratsy, ny haavon'ny fluorescence ΔRn amin'ny efitrano fanaraha-maso tsara dia 0.860, ary ny ΔRn an'ny IAV sy IBV dia mitovy amin'ny fanaraha-maso ratsy (0.002).Ho an'ny vondrona IAV+/IBV-, IAV-/IBV+ ary IAV+/IBV+, ny fakan-tsary IAV/GAPDH, IBV/GAPDH ary IAV/IBV/GAPDH dia mampiseho ny hamafin'ny fluorescence lehibe, raha ny fakantsary hafa kosa dia nampiseho ny hamafin'ny fluorescence teo amin'ny lamosina. haavon'ny 40 aorian'ny fihodinana mafana.Avy amin'ireo fitsapana etsy ambony, ny sehatra FAST-POCT dia naneho ny maha-tokana azy ary nahafahan'izy ireo nifanena tamin'ny viriosy gripa samihafa.
Mba hanamarinana ny fampiharana klinika amin'ny FAST-POCT, dia nanandrana santionany klinika 36 izahay (sokajy orona) avy amin'ny marary IB (n = 18) sy ny fanaraha-maso tsy IB (n = 18) (sary 6a).Ny fampahalalana momba ny marary dia aseho amin'ny tabilao fanampiny 3. Ny satan'ny otrikaretina IB dia voamarina tsy miankina ary ny protocole fianarana dia nankatoavin'ny Zhejiang University First Affiliated Hospital (Hangzhou, Zhejiang).Nozaraina ho sokajy roa ny santionan'ny marary tsirairay.Ny iray dia nokarakaraina tamin'ny alàlan'ny FAST-POCT ary ny iray kosa nokarakaraina tamin'ny alàlan'ny rafitra PCR desktop (SLAN-96P, Shina).Ireo fitsapana roa ireo dia mampiasa fitaovana fanadiovana sy fitiliana mitovy.Ao amin'ny fig.6b dia mampiseho ny valin'ny FAST-POCT sy ny PCR transcription mahazatra (RT-PCR).Nampitahainay ny hamafin'ny fluorescence (FAST-POCT) miaraka amin'ny -log2(Ct), izay i Ct no tokonam-baravarankely ho an'ny RT-PCR mahazatra.Nisy fifanarahana tsara teo amin'ireo fomba roa ireo.FAST-POCT sy RT-PCR dia nampiseho fifandraisana tsara matanjaka miaraka amin'ny sandan'ny Pearson (r) 0.90 (sary 6b).Avy eo dia nanombana ny fahamarinan'ny diagnostika FAST-POCT izahay.Ny fizarana fluorescence intensity (FL) ho an'ny santionany tsara sy ratsy dia nomena ho fepetra famakafakana tsy miankina (sary 6c).Ny sandan'ny FL dia avo kokoa amin'ny marary IB noho ny fanaraha-maso (**** P = 3.31 × 10-19; t-test roa-tailed) (sary 6d).Avy eo, ny curve IBV Receiver Operating Characters (ROC) dia novolavolaina.Hitanay fa tena tsara ny fahamarinan'ny diagnostika, misy faritra eo ambanin'ny curve 1 (sary 6e).Azafady, azafady fa noho ny famandrihana saron-tava tsy maintsy atao any Shina noho ny COVID-19 hatramin'ny 2020, dia tsy fantatray ireo mararin'ny IBD, noho izany dia natao ho an'ny IBV ihany ny santionany klinika tsara rehetra (izany hoe, santionany nasal swab).
Famolavolana fandalinana klinika.Santionany 36, anisan'izany ny santionan'ny marary 18 sy ny fanaraha-maso tsy misy gripa 18, dia nodinihina tamin'ny alàlan'ny sehatra FAST-POCT sy RT-PCR mahazatra.b Tombanana ny fifanarahan'ny famakafakana eo amin'ny FAST-POCT PCR sy ny RT-PCR mahazatra.Ny valiny dia nifanaraka tsara (Pearson r = 0.90).c Ny haavon'ny fluorescence amin'ny marary 18 IB sy ny fanaraha-maso 18.d Ao amin'ny marary IB (+), ny sandan'ny FL dia avo kokoa noho ny ao amin'ny vondrona mpanara-maso (-) (**** P = 3.31 × 10-19; t-test roa-tailed; n = 36).Ho an'ny kianja efamira tsirairay, ny marika mainty eo afovoany dia maneho ny mediana, ary ny tsipika ambany sy ambony amin'ny boaty dia maneho ny isan-jato faha-25 sy faha-75.Ny volombava dia miitatra hatrany amin'ny teboka farany ambany sy ambony indrindra, izay tsy heverina ho ambony.ary ROC curve.Ny tsipika misy teboka d dia maneho ny sandan'ny tokonam-baravarana tombanana amin'ny fanadihadiana ROC.Ny AUC ho an'ny IBV dia 1. Ny angona manta dia omena ho rakitra angona manta.
Amin'ity lahatsoratra ity dia manolotra FAST izahay, izay manana ny toetra ilaina amin'ny POCT mety indrindra.Ny tombony amin'ny teknolojia misy antsika dia: (1) Dosing isan-karazany (cascade, simultaneous, sequential and selective), famotsorana amin'ny fangatahana (famoahana haingana sy mifandanja amin'ny fanerena ampiharina) ary asa azo antoka (vibration amin'ny 150 degre) (2) fitehirizana maharitra. (2 taona nanaovana fitiliana haingana, fihenam-bidy eo amin'ny 0,3%);(3) ny fahafahana miasa amin'ny ranon-javatra amin'ny isan-karazany ny wettability sy viscosity (viscosity hatramin'ny 5500 cP);(4) Ara-toekarena (Tombanana eo amin'ny US$1 eo ho eo ny vidin'ny fitaovana FAST-POCT PCR).Amin'ny fampifangaroana ireo dispenseur multifunctional, dia naseho sy nampiharina ny sehatra FAST-POCT ho an'ny PCR fitiliana ny viriosy gripa A sy B.FAST-POCT dia 82 minitra monja.Ny fitsapana klinika miaraka amin'ny santionan'ny nasal swab 36 dia nampiseho fifanarahana tsara amin'ny hamafin'ny fluorescence miaraka amin'ny RT-PCR mahazatra (pearson coefficients> 0.9).Ny fitsapana klinika miaraka amin'ny santionan'ny nasal swab 36 dia nampiseho fifanarahana tsara amin'ny hamafin'ny fluorescence miaraka amin'ny RT-PCR mahazatra (pearson coefficients> 0.9).Клинические тесты с 36 образцами мазков из носа показали хорошее соответствие интенсивности флуоресценциТТТА иенты Пирсона > 0,9).Ny fitsapana klinika miaraka amin'ny santionan'ny swab nasal 36 dia nampiseho fifanarahana tsara amin'ny hamafin'ny fluorescence amin'ny RT-PCR mahazatra (pearson's coefficients> 0.9). RT-PCR Клинические испытания 36 образцов мазков из носа показали хорошее совпадение интенсивности флуоресценцни Россия ициент Пирсона > 0,9).Ny fitsapana klinika amin'ny santionany 36 nasal swab dia nampiseho fifanarahana tsara momba ny hamafin'ny fluorescence miaraka amin'ny RT-PCR mahazatra (pearson's coefficient > 0.9).Mifanaraka amin'ity asa ity, ny fomba biochemika mipoitra isan-karazany (ohatra, ny tsingerin'ny thermal plasma, ny immunoassays tsy misy amplification, ary ny fitiliana fampiasa amin'ny nanobody) dia naneho ny tanjaky ny POCT.Na izany aza, noho ny tsy fisian'ny sehatra POCT mitambatra tanteraka sy matanjaka, ireo fomba ireo dia tsy maintsy mitaky fomba fiasa mialoha mialoha (ohatra, RNA isolation44, incubation45 ary washing46), izay mameno bebe kokoa ny asa amin'izao fotoana izao amin'ireo fomba fampiharana ireo fiasa POCT mandroso ny masontsivana ilaina.fampandehanana fetch-in-response-output.Amin'ity asa ity, na dia kely aza ny paompy rivotra ampiasaina amin'ny fampandehanana ny valva FAST mba hampidirana ao anaty fitaovana benchtop (sary S9, S10), dia mbola mandany hery lehibe izy io ary miteraka tabataba.Amin'ny ankapobeny, ny paompy pneumatika kely kokoa dia azo soloina amin'ny fomba hafa, toy ny fampiasana hery elektromagnetika na fihetsika amin'ny rantsantanana.Ny fanatsarana fanampiny dia mety ahitana, ohatra, ny fampifanarahana ny kitapo ho an'ny fitsirihana biochemika samihafa sy manokana, amin'ny fampiasana fomba fitiliana vaovao izay tsy mitaky rafitra fanafanana / fampangatsiahana, ka manome sehatra POCT tsy misy fitaovana ho an'ny fampiharana PCR.Mino izahay fa nomena ny sehatra FAST manome fomba hanodinana ranon-javatra, mino izahay fa ny teknolojia FAST natolotra dia manolotra ny mety hamorona sehatra iraisana tsy ho an'ny fitiliana biomedical ihany, fa koa ho an'ny fanaraha-maso ny tontolo iainana, fitiliana ny kalitaon'ny sakafo, ny akora sy ny zava-mahadomelina. ..
Nankatoavin'ny Komitin'ny Etika ao amin'ny Zhejiang University First Affiliated Hospital (IIT20220330B) ny fanangonana sy ny fampiasana ny santionany amin'ny santionany nasal olona.Santionany 36 nasal swab voaangona, nahitana olon-dehibe 16 <30 taona, 7 lehibe > 40 taona, ary 19 lahy, 17 vavy.Santionany 36 nasal swab voaangona, nahitana olon-dehibe 16 <30 taona, 7 lehibe > 40 taona, ary 19 lahy, 17 vavy.Было собрано 36 образцов мазков из носа, в которых приняли участие 16 взрослых < 30 лет, 7 взрослых 40 стар енщин.Ny santionany nasal swab enina amby telopolo no nangonina tamin'ny olon-dehibe 16 <30 taona, olon-dehibe 7 mihoatra ny 40 taona, lehilahy 19 ary vehivavy 17..Ny angona demografika dia aseho amin'ny tabilao fanampiny 3. Nahazoana alalana avy amin'ny mpandray anjara rehetra.Ny mpandray anjara rehetra dia nahiahina ho voan'ny gripa ary natao fitiliana an-tsitrapo tsy misy tambiny.
Ny fototra FAST sy ny sarony dia vita amin'ny asidra polylactic (PLA) ary vita pirinty amin'ny mpanonta Ender 3 Pro 3D (Shenzhen Transcend 3D Technology Co., Ltd.).Novidina tao amin'ny Adhesives Research, Inc. Model 90880 ny kasety misy sisiny roa. Novidina tao amin'ny McMaster-Carr ny sarimihetsika PET 100 µm matevina.Na ny adhesive sy ny sarimihetsika PET dia notapatapahina tamin'ny fampiasana ny Silhouette Cameo 2 cutter avy amin'ny Silhouette America, Inc. Ny sarimihetsika elastika dia vita amin'ny fitaovana PDMS amin'ny alàlan'ny famolavolana tsindrona.Voalohany, notapatapahina tamin'ny alalan'ny rafitra laser ny rafitra PET 200 µm matevina ary napetaka tamin'ny takelaka PMMA 3 mm matevina tamin'ny fampiasana kasety adhesive 100 µm roa sosona.Ny mpialoha lalana PDMS (Sylgard 184; Fizarana A: Fizarana B = 10: 1, Dow Corning) dia nararaka tao anaty lasitra ary nampiasaina ny tsorakazo mba hanesorana ny PDMS be loatra.Rehefa avy nanasitrana tamin'ny 70 ° C. nandritra ny 3 ora, ny sarimihetsika PDMS matevina 300 μm dia azo nesorina tamin'ny bobongolo.
Ny sary ho an'ny fizarana maro samihafa, ny famoahana amin'ny fangatahana ary ny fampisehoana azo itokisana dia alaina amin'ny fakantsary haingam-pandeha (Sony AX700 1000 fps).Novidina tamin'ny SCILOGEX (SCI-O180) ny fihozongozonana orbitra ampiasaina amin'ny fitsapana azo itokisana.Ny tsindrin'ny rivotra dia ateraky ny compressor an'habakabaka, ary ireo mpandrindra fanerena fanerena nomerika maromaro no ampiasaina hanitsiana ny sandan'ny tsindry.Toy izao manaraka izao ny fizotran'ny fitiliana fitondran-tena.Nisy ranon-javatra efa voafaritra mialoha natsindrona tao amin'ilay fitaovana fitiliana ary fakan-tsary haingam-pandeha no nampiasaina handrakitra ny fihetsika mikoriana.Avy eo dia nalaina sary avy amin'ny horonan-tsary momba ny fikorianan'ny rivotra amin'ny fotoana voafaritra, ary ny faritra sisa dia kajy amin'ny alàlan'ny rindrambaiko Image-Pro Plus, izay ampitomboina amin'ny halalin'ny fakan-tsary mba kajy ny habe.Ny antsipirihan'ny rafitra fitiliana fitondran-tena dia hita ao amin'ny sary fanampiny S4.
Atsindrona 50 µl microbeads sy 100 µl deionized rano ao anaty vial fangaro.Nalaina tamin'ny fakan-tsary avo lenta isaky ny 0,1 segondra ny sary fampifangaroana fampisehoana tamin'ny fanerena 0,1 bar, 0,15 bar ary 0,2 bar.Ny fampahalalam-baovao pixel mandritra ny fampifangaroana dia azo alaina amin'ireo sary ireo amin'ny fampiasana rindrambaiko fanodinana sary (Photoshop CS6).Ary ny fahombiazan'ny fampifangaroana dia azo tratrarina amin'ny Equation 53 manaraka.
izay M dia ny fahombiazan'ny fampifangaroana, N dia ny fitambaran'ny isan'ny santionany piksela, ary ny ci sy ny \(\bar{c}\) dia ny normalised sy antenaina fifantohana.Ny fahombiazan'ny fampifangaroana dia manomboka amin'ny 0 (0%, tsy mifangaro) hatramin'ny 1 (100%, mifangaro tanteraka).Ny vokatra dia aseho amin'ny sary fanampiny S6.
Kit RT-PCR amin'ny fotoana tena izy ho an'ny IAV sy IBV, anisan'izany ny santionany IAV sy IBV RNA (kat. no. RR-0051-02/RR-0052-02, Liferiver, Sina), Tris-EDTA buffer (TE buffer no. B541019 , Sangon Biotech, Shina), Positive Control RNA Purification Kit (Part No. Z-ME-0010, Liferiver, China) ary GAPDH Solution (Part No. M591101, Sangon Biotech, Shina) dia azo amidy.Ny kitapo fanadiovana RNA dia misy buffer mamatotra, manasa A, manasa W, eluent, microbeads magnetika, ary mpitatitra acryl.Ny kitapo RT-PCR tena misy IAV sy IBV dia misy fifangaroana fitiliana PCR asidra nukleika IFVA sy anzima RT-PCR.Ampio 6 µl AcrylCarrier sy 20 µl vakana magnetika amin'ny 500 µl amin'ny vahaolana buffer mamatotra, kobano tsara ary omano ny vahaolana vakana.Ampio ethanol 21 ml ny fanasan-damba A sy W, mihozongozona tsara mba hahazoana vahaolana amin'ny fanasana A sy W, tsirairay avy.Avy eo, 18 µl ny fluorescent PCR fangaro miaraka amin'ny IFVA nucleic asidra sy 1 µl ny RT-PCR enzyme dia nampiana 1 µl ny vahaolana TE, nohozongozonina sy centrifuged nandritra ny segondra maromaro, nahazo 20 µl ny IAV sy IBV primers.
Araho ity fomba fanadiovana RNA manaraka ity: (1) Adsorption RNA.Pipette 526 µl ny vahaolana pellet ao anaty fantsona centrifuge 1,5 ml ary ampio 150 µl santionany, avy eo ahetsiketsika in-10 ny fantsona miakatra sy midina.Alefaso 676 µl ny fangaro amin'ny tsanganana affinity ary centrifuge amin'ny 1.88 x 104 g mandritra ny 60 segondra.Esorina avy eo ny tatatra manaraka.(2) Ny dingana voalohany amin'ny fanasana.Ampio 500 µl amin'ny tsanganana fanasan-damba A amin'ny tsanganana affinity, centrifuge amin'ny 1,88 x 104 g mandritra ny 40 s, ary ario ny vahaolana lany.Naverina indroa io fanasan-damba io.(3) ny dingana faharoa amin'ny fanasana.Ampio 500 µl ny ranon-javatra fanasan-damba W amin'ny tsanganana affinity, centrifuge amin'ny 1.88 × 104 g mandritra ny 15 s ary ario ny vahaolana lany.Naverina indroa io fanasan-damba io.(4) Elution.Ampio 200 µl eluate amin'ny tsanganana affinity ary centrifuge amin'ny 1,88 x 104 g mandritra ny 2 min.(5) RT-PCR: Ny eluate dia natsindrona tao amin'ny 20 μl ny vahaolana voalohany tao anaty tavoahangy PCR, avy eo dia napetraka tao amin'ny fitaovana fitiliana PCR (SLAN-96P) tena izy ny fantsona mba hanatanterahana ny dingana RT-PCR.Maharitra 140 minitra eo ho eo ny fizotran'ny fitiliana manontolo (20 minitra ho an'ny fanadiovana RNA ary 120 minitra ho an'ny PCR).
526 µl ny vakana vahaolana, 1000 µl ny wash solution A, 1000 µl ny wash solution W, 200 µl of eluate ary 20 µl ny primer solution dia nampiana aloha ary notehirizina tao amin'ny efitrano M, W1, W2, E ary PCR.Fivoriambe amin'ny sehatra.Avy eo, 150 µl ny santionany dia napetaka tao amin'ny efitrano M ary ny sehatra FAST-POCT dia nampidirina tao amin'ny fitaovana fitsapana aseho amin'ny sary fanampiny S9.Rehefa afaka 82 minitra teo ho eo, dia nisy ny valin'ny fitsapana.
Raha tsy misy fanamarihana manokana, ny valim-panadinana rehetra dia aseho ho midika hoe ± SD aorian'ny famerenana enina farafahakeliny amin'ny fampiasana ny sehatra FAST-POCT sy ny santionany mahaleo tena biolojika.Tsy nisy angona nesorina tamin'ny fanadihadiana.Tsy kisendrasendra ny andrana.Tsy jamba tamin'ny asan'ny vondrona nandritra ny fanandramana ireo mpikaroka.
Raha mila fanazavana fanampiny momba ny famolavolana fandalinana dia jereo ny sarintanin'ny Nature Research Report mifandray amin'ity lahatsoratra ity.
Ny angona manohana ny valin'ity fanadihadiana ity dia hita ao amin'ny Fampahalalam-baovao fanampiny.Ity lahatsoratra ity dia manome ny angona tany am-boalohany.
Chagla, Z. & Madhukar, P. Ny mpanentana COVID-19 any amin'ny firenena manankarena dia hanemotra ny vaksiny ho an'ny rehetra.Chagla, Z. & Madhukar, P. Ny mpanentana COVID-19 any amin'ny firenena manankarena dia hanemotra ny vaksiny ho an'ny rehetra.Chagla, Z. ary Madhukar, P. COVID-19 boosters any amin'ny firenena manankarena dia hanemotra ny vaksiny ho an'ny rehetra.Chagla, Z. ary Madhukar, P. Ny famerenana indray ny COVID-19 any amin'ny firenena manankarena dia hanemotra ny fanaovana vaksiny ho an'ny rehetra.Fitsaboana nasionaly.27, 1659–1665 (2021).
Faust, L. et al.Fitsapana SARS-CoV-2 any amin'ny firenena ambany sy antonony: ny fahazoana sy ny vidiny amin'ny sehatry ny fitsaboana tsy miankina.otrikaretina mikraoba.22, 511–514 (2020).
Fikambanambe Iraisam-pirenena momba ny Fahasalamana.Ny fihanaky ny aretina maneran-tany sy ny fihanaky ny aretina azo avy amin'ny firaisana ara-nofo voafantina: famerenana sy tombana.Genève: OMS, OMS/HIV_AIDS/2 https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/66818/WHO_HIV_AIDS_2001.02.pdf (2001).
Fenton, EM et al.Tavoahangy fitsapana 2D maromaro novolavolaina.Fampiharana ASS.almà.Inter Milan.1, 124–129 (2009).
Schilling, KM et al.Fitaovana famakafakana mifototra amin'ny taratasy mikraoba feno.anus.Chemical.84, 1579–1585 (2012).
Lapenter, N. et al.Ny immunochromatography mifototra amin'ny taratasy mifaninana miaraka amin'ny electrodes novaina anzima dia mamela ny fanaraha-maso tsy misy tariby sy ny famaritana electrochemical ny cotinine urinary.Sensors 21, 1659 (2021).
Zhu, X. et al.Famaritana ny biomarker aretina miaraka amin'ny sehatra fluide lateral misy nanozyme azo ampiasaina amin'ny fampiasana glucometer.sensor biolojika.Bioelectronics.126, 690–696 (2019).
Boo, S. et al.Fitsapana fitsapana ho an'ny bevohoka amin'ny fitadiavana bakteria pathogen amin'ny fampiasana concanavalin A-human chorionic gonadotropin-Cu3(PO4)2 hybrid nanoflowers, fisarahana magnetika ary famakiana finday.Microcomputer.Gazety.185, 464 (2018).